В этот раз она была приурочена к Году науки и технологий и посвящена 60-летию полёта Юрия Гагарина в космос. Торжественное открытие состоялось в Российской государственной библиотеке для молодёжи, ставшей одной из главных площадок акции. В нём приняли участие министр культуры РФ Ольга Любимова, заместитель министра Ольга Ярилова, директор РГБДМ Ирина Мехнова, генеральный директор РГБ Вадим Дуда, лётчик-космонавт Александр Мисуркин и писатель-фантаст Сергей Лукьяненко.
Трансляция из библиотеки была прервана громким обращением «Земля, как слышно? Приём!», донёсшимся из... космоса. Участников акции «Библионочь-2021» поприветствовали члены экипажа МКС Олег Новицкий и Пётр Дубров, напомнив, что «путь к звёздам начинается с книг».
Традиционно в акции приняло участие более 40 тысяч библиотек, культурных центров и книжных магазинов страны. В Сети трансляции 135 событий «Библионочи» посмотрели более 3 миллионов книголюбов. В программе были заявлены многочисленные дискуссии, лекции, мастер-классы, кинопоказы и выставки, так или иначе связанные с темой космоса. Но, конечно же, в центре внимания организаторов и участников оставались книги и писатели – главные герои любой «Библионочи». В рамках акции прошли творческие встречи со Львом Данилкиным, Андреем Рубановым, Александром Архангельским, Гузелью Яхиной, Александром Иличевским, Дмитрием Даниловым и другими современными авторами.